一、实验目的

本研究利用分散固相萃取（QuEChERS）法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测猪肉中的四环素类药物多残留。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、应用范围

本方法适用于肉制品中的四环素类药物多残留检测及确证。

三、实验材料

兽残专用QuEChERS提取管50 mL (HuaXue-Bio Cat. No. Q050051)。
兽残专用QuEChERS净化管15 mL (HuaXue-Bio Cat. No. Q015601)。

四、实验步骤

1、样品提取
准确称取粉碎好的猪肉2.0 g于50 mL QuEChERS提取管中，加入QuEChERS盐包(Cat. No.Q050051)，加入10 mL 1%乙酸乙腈，涡旋1min，用力振摇1 min，5000 r/min离心5 min。上层乙腈层待净化。

2、样品净化
取待净化的上层乙腈层6 mL于15 mL QuEChERS净化管(Cat. No. Q015601)中，涡旋 1 min，5000 r/min离心5 min。取上清液4 mL转移至另一试管中，40 ℃下氮吹至干，用1 mL三氟乙酸水：甲醇(1:19,v/v)复溶，过0.22 μm滤膜，待上机测试。

3、HPLC仪器条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：Phenomenex kinetex® (250 mm×4.6 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2996 DAD检测器
检测波长：254 nm
流动相：A：乙腈 B：10mM三氟乙酸水溶液
洗脱方式：梯度洗脱
表1 流动相梯度洗脱程序

流速：1 mL/min
进样体积：20 μL

五、实验结果

1、1.0 mg/kg猪肉中四环素类药物多残留的添加回收率结果
表2 1.0 mg/kg猪肉中四环素类药物多残留的添加回收率结果

2、 添加水平为1.0 mg/kg猪肉中四环素类药物多残留的液相色谱图

 

图1 添加水平为1.0 mg/kg猪肉中四环素类药物多残留的液相色谱图

本方法回收率和RSD满足标准要求。